Mycotoxin Ochratoxin Kit Tes Cepat Untuk Pakan Grain 96 Wells/Kit Sensitivitas 0,1 Ppb

Ochratoxin A ELISA Test Kit untuk Feed Grain 96 Wells/Kit Sensitivity 0.1 ppb

1. Prinsip dan penggunaan

Okratoksin adalah metabolit sekunder yang dihasilkan oleh spesies tertentu dari genus Aspergillus dan Penicillium.Di antara mereka, ochratoxin A adalah yang paling banyak didistribusikan di alam dan memiliki toksisitas terkuat, dan memiliki dampak terbesar pada manusia, hewan dan tumbuhan.
Kit ini menggunakan ELISA kompetitif tidak langsung untuk mendeteksi okratoksin (Ochratoxins A, OTA) dalam sereal dan sampel pakan seperti bihun, kacang tanah, dan kedelai.Kit ini terdiri dari pelat antigen pra-dilapisi dan konjugat enzim, antibodi, standar dan reagen pendukung lainnya.Selama pengujian, larutan standar atau sampel ditambahkan, okratoksin dalam sampel dan antigen pra-dilapisi di piring untuk bersaing dengan antibodi okratoksin, dan setelah menambahkan konjugat enzim, melalui substrat TMB menunjukkan warna, nilai absorbansi sampel Ochratoxin memiliki korelasi negatif dengan isinya, dibandingkan dengan kurva standar dan kemudian dikalikan dengan faktor pengenceran yang sesuai, dapat menarik kandungan Ochratoxin dalam sampel.

2. Spesifikasi teknis

Sensitivitas: 0.1ppb (ng/ml)

Inkubasi: 37 , 30 menit ~ 30 menit ~ 15 menit

Batas deteksi:
Butir 1ppb
Umpan 2ppb

Laju reaksi silang
Okratoksin A 100%

Tingkat pemulihan:
Gandum, pakan 85±15%

3. Komponen

4. Bahan yang dibutuhkan tetapi tidak disediakan

1) Peralatan: ELISA reader (450nm/630nm), printer, vortex (pengocok opsional), centrifuge, keseimbangan: sensitif kuantitas 0,01g, pipet bertingkat, homogenizer;
2) Mikropipet: saluran tunggal 20ml ~ 200ml, 100ml ~ 1000ml, multi-saluran 300ml.
3) Reagen: Metanol, NaHCO , Air deionisasi.

5. Sampel pra-perawatan

5.1 Persiapan larutan sebelum pra-perawatan sampel:
1) 70% Metanol
7 bagian Metanol + 3 bagian air deionisasi;
2) larutan NaHCO 0,1M
Timbang 4.2g NaHCO , tambahkan air deionisasi hingga larut menjadi 500ml;
3) Pencucian penyangga
1 bagian dari 20X buffer pencuci pekat dan larutkan dengan 19 bagian air deionisasi untuk mendapatkan buffer pencuci siap pakai.

5.2 Persiapan Gabah (beras, jagung, millet, dll.)
1) Timbang 2g sampel homogen ke dalam tabung centrifuge 50ml, tambahkan 10ml 70% Methanol, kocok selama 5 menit, Centrifuge pada 4000 r / menit pada suhu kamar selama 10 menit;
2) Ambil 1ml cairan bening lapisan atas, tambahkan 1ml larutan 0,1M NaHCO, kocok hingga merata;
3) Ambil cairan 50ul untuk diuji
Faktor pengenceran: 10 Batas deteksi: 1ppb

5.3 Persiapan Pakan
1) Timbang 2g sampel homogen ke dalam tabung centrifuge 50ml, tambahkan 20ml 70% Methanol, kocok selama 5 menit, Centrifuge pada 4000 r / menit pada suhu kamar selama 10 menit;
2) Ambil 1ml cairan bening lapisan atas, tambahkan 1ml larutan 0,1M NaHCO, kocok hingga merata;
3) Ambil cairan 50ul untuk diuji
Faktor pengenceran: 20 Batas deteksi: 2ppb

6. Prosedur ELISA

1) Bawa test kit ke suhu kamar (20-25 ) setidaknya selama 30 menit, buffer pencuci pekat 20X mungkin memiliki kristalisasi saat disimpan dalam dingin, perlu kembali ke suhu kamar untuk larut sepenuhnya;perhatikan bahwa setiap reagen harus dikocok secara merata sebelum digunakan;Masukkan strip sumur mikro yang diperlukan ke dalam bingkai pelat.Tutup kembali microplate yang tidak terpakai, simpan pada suhu 2-8 , jangan dibekukan.
2) Penomoran: beri nomor sumur mikro menurut sampel dan larutan standar;setiap sampel dan larutan standar harus dilakukan dalam rangkap dua;merekam posisi mereka.
3) Tambahkan standar/sampel: Tambahkan 50 L sampel atau larutan standar ke dalam sumur duplikat yang terpisah, kemudian tambahkan larutan kerja antibodi, 50µL/sumur.Aduk perlahan dengan mengocok pelat secara manual, tutup mikroplate dengan membran penutup, inkubasi pada suhu 37℃ selama 30 menit dalam gelap.
4) Cuci pelat mikro: Buka membran penutup dengan hati-hati, tuangkan cairan dari sumur mikro;tambahkan 350 L/sumur wash buffer, cuci bersih sebanyak 5 kali, setiap kali 30 detik, lalu keluarkan dan lap hingga kering dengan kertas penyerap. (Gunakan tombak yang tidak digunakan untuk menembus gelembung setelah kering)
5) Tambahkan enzim konjugat: tambahkan enzim konjugat, 100 L/well.Aduk perlahan dengan mengocok pelat secara manual, tutup pelat mikro dengan membran penutup, inkubasi pada suhu 37℃ selama 30 menit dalam gelap.
Cuci seperti langkah 4).
6) Pewarnaan: tambahkan 50 L substrat A kemudian 50 L substrat B ke dalam masing-masing sumur.Aduk perlahan dengan mengocok plat secara manual, dan inkubasi pada suhu 37℃ selama 15 menit gelap untuk pewarnaan.(Jika warna biru terlalu terang, waktu reaksi dapat diperpanjang dengan tepat)
7) Penentuan: tambahkan 50 L stop solution ke dalam setiap sumur.Aduk perlahan dengan mengocok piring secara manual.Atur panjang gelombang pembaca pelat mikro pada 450nm untuk menentukan nilai OD setiap sumur.(Merekomendasikan untuk membaca nilai OD pada panjang gelombang ganda 450/630nm dalam 10 menit).

7. Hasil penilaian

Untuk menghitung konsentrasi sampel, kurva standar harus dibuat.Sebelum kurva standar dibuat, konsep % absorbansi harus diketahui.
Perhitungan % absorbansi:

B—nilai OD rata-rata dari sampel atau larutan standar.
B0—nilai OD rata-rata dari larutan standar 0 ng/mL.
Standar nol dengan demikian dibuat sama dengan 100% dan nilai absorbansi dikutip dalam persentase.Nilai yang dihitung untuk standar dimasukkan dalam sistem koordinat pada kertas grafik semilogaritmik terhadap konsentrasi okratoksin A [μg/kg].Konsentrasi okratoksin A dalam g/kg (ppb) yang sesuai dengan absorbansi setiap sampel dapat dibaca dari kurva kalibrasi.
Perangkat lunak khusus untuk analisis hasil ELISA akan memfasilitasi penentuan ganda atau ganda.Jika Anda membutuhkan, silakan hubungi untuk meminta.

8. Tindakan Pencegahan

1) Suhu kamar di bawah 25 atau suhu reagen dan sampel yang tidak dikembalikan ke suhu kamar (25 ) akan menyebabkan nilai OD standar yang lebih rendah.
2) Kekeringan pelat mikro dalam proses pencucian akan disertai dengan situasi termasuk kurva standar non-linier dan reproduktifitas yang tidak diinginkan;jadi lanjutkan ke langkah berikutnya segera setelah dicuci.
3) Aduk rata sebelum menambahkan reagen apapun.
4) Solusi stop adalah larutan asam sulfat 2 M, hindari kontak dengan kulit.
5) Jangan gunakan kit melebihi tanggal kedaluwarsa.Penggunaan reagen yang diencerkan atau dipalsukan dari kit akan menyebabkan perubahan sensitivitas dan nilai OD pendeteksian.Jangan menukar reagen dari kit dengan nomor lot yang berbeda untuk digunakan.
6) Penyimpanan: simpan pada suhu 2-8 , tidak beku.Masukkan pelat mikro yang tidak digunakan ke dalam kantong penyegel otomatis untuk menyegelnya kembali.Zat standar dan pembentuk warna tidak berwarna peka terhadap cahaya, sehingga tidak dapat langsung terkena cahaya.
7) Buang larutan pewarna dengan warna apapun yang menunjukkan degenerasi larutan ini.Nilai pendeteksian (450/630nm) dari larutan standar 0 (0 ppb) kurang dari 0,5((A450nm<0,5)) menunjukkan degenerasinya.

9. Penyimpanan dan tanggal kedaluwarsa

Penyimpanan: simpan pada 2-8 , tidak beku.
Tanggal kedaluwarsa: 12 bulan;tanggal produksi ada di box.

Q1: Kapan akan dikirim?
A1: Kami akan mengirimkan barang untuk Anda sesegera mungkin dalam waktu 7 hari kerja setelah menerima pembayaran.(Dalam kasus faktor eksternal seperti epidemi, pengiriman mungkin tertunda)

Q2: Apakah mendukung OEM/ODM?
A2: Ini dapat didukung, tetapi jumlah spesifik harus lebih dari 100.000 buah, yang nyaman untuk produk yang disesuaikan.

Q3: Bagaimana kinerja pabrik Anda dalam hal kontrol kualitas?
A3: Kami memiliki sertifikasi ISO9001 dan ISO13485 secara nasional.Proses produksi kami sesuai dengan prosedur standar untuk memastikan kualitas produk yang optimal.

Q4: Bagaimana memberikan layanan purna jual?
A4: Kami menyediakan layanan purna jual teknis online profesional.Kami dapat memberi Anda panduan pribadi melalui video, telepon, dll.

Q5: Apa metode pembayarannya?
A5: Kami menerima pembayaran dengan T/T.

Q6: Bagaimana cara mengirim?
A6: Pilih metode pengiriman terbaik untuk Anda dengan mendapatkan penawaran dari banyak operator kooperatif kami, dan juga mengirimkan sesuai dengan kebutuhan Anda.