0.1ppb Zearalenone Mycotoxin Testing Kits Untuk Pakan Jagung 96 Sumur / Kit

Zearalenone ELISA Test Kit untuk Pakan Jagung 96 Sumur/Sensitivitas Kit 0.1 ppb

 

1. Prinsip

Kit tes ini didasarkan pada enzim immunoassay kompetitif untuk mendeteksi Zearalenone.Antigen kopling sudah dilapisi sebelumnya pada garis-garis sumur mikro.Zearalenone dalam sampel dan antigen kopling pra-dilapisi pada garis-garis sumur mikro bersaing untuk antibodi anti- Zearalenone.Setelah penambahan enzim konjugat, substrat TMB ditambahkan untuk pewarnaan.Nilai optical density (OD) sampel memiliki korelasi negatif dengan Zearalenone dalam sampel.Nilai ini dibandingkan dengan kurva standar dan residu Zearalenone selanjutnya diperoleh.

2. Spesifikasi teknis

Sensitivitas: 0,1 ppb
Suhu inkubator: 25
Waktu inkubator: 30 menit 15 menit

Batas deteksi:
Umpan 10ppb
Nasi, Jagung, Kacang 5ppb

Laju reaksi silang:
Zearalenon 100%

Tingkat pemulihan:
Pakan, beras, Kacang tanah, jagung 100±30%

3. Komponen

 

 

1	Strip sumur mikro	12 strip dengan masing-masing 8 sumur yang dapat dilepas
2	6× larutan standar (masing-masing 1 mL)	0 ppb	0,1 ppb
		0,3 ppb	0,9 ppb
		2,7 ppb	8.1 ppb
3	Konjugasi enzim	7 ml	topi merah
4	Solusi kerja antibodi	7 ml	topi biru
5	Substrat A	7 ml	topi putih
6	SubstratB	7 ml	topi hitam
7	Hentikan solusi	7 ml	topi kuning
8	20X buffer pencuci konsentrat	40 ml	topi putih
9	2X larutan pelarutan kembali pekat	50 ml	topi transparan

 

4. Bahan yang dibutuhkan tetapi tidak disediakan

1) Peralatan: ELISA Reader (450 nm/630nm), homogenizer, shaker, centrifuge, timbangan: sensitif kuantitas 0,01g, perangkat pengering nitrogen, inkubator, pipet bertingkat, printer
2) Mikropipet: saluran tunggal 20l ~ 200l, 100l ~ 1000l, multi-saluran 30～300 l
3) Reagen: Metanol, n-heksana.

5. Sampel pra-perawatan

Instruksi (Hal-hal berikut harus ditangani sebelum pra-perawatan)
1) Hanya ujung sekali pakai yang dapat digunakan untuk eksperimen dan ujungnya harus diganti bila digunakan untuk menyerap reagen yang berbeda;
2) Sebelum percobaan, setiap alat percobaan harus bersih dan bila perlu dibersihkan kembali untuk menghindari kontaminasi yang mengganggu hasil percobaan.

Persiapan larutan sebelum sampel pra-perawatan:
Solusi tidak.1: Contoh pelarutan kembali
Larutan pelarutan kembali pekat 2x diencerkan dengan air deionisasi pada 1:1 (1 bagian larutan pelarutan kembali pekat + 1 bagian air deionisasi), digunakan untuk pelarutan kembali sampel.
Solusi tidak.2: Contoh larutan ekstrak
7 bagian Metanol + 3 bagian air deionisasi untuk mendapatkan larutan ekstrak sampel siap pakai.

Persiapan Sampel
5.1 Persiapan sampel Pakan
1) Ambil 1,0 ± 0,05 g sampel pakan yang digiling ke dalam tabung centrifuge 50ml, tambahkan larutan ekstrak sampel 5ml;
2) Kocok sepenuhnya selama 3 menit (atau kocok dengan tangan selama di atas 5 menit), sentrifus di atas 4000r/menit pada 20 selama 10 menit;
3) Ambil supernatan 50ul (lapisan atas), tambahkan 950ul sampel yang larut kembali, kocok hingga merata;
4) Ambil 50μl untuk menguji
Faktor pengenceran: 100
Catatan: jika konsentrasi residu obat dalam sampel berada di luar kisaran kurva, sampel dapat diencerkan lebih lanjut untuk pengujian (misalnya: ambil supernatan 50ul (lapisan atas) ke dalam tabung sentrifus baru, tambahkan air deionisasi 1450ul, faktor pengenceran adalah 150).

5.2Persiapan jagung, sampel beras
1) Ambil 1,0 ± 0,05 g sampel yang digiling ke dalam tabung centrifuge 50ml;tambahkan 5ml larutan ekstrak sampel;
2) Kocok sepenuhnya selama 3 menit (atau kocok dengan tangan selama di atas 5 menit), sentrifus di atas 4000r/menit pada 20 selama 10 menit;
3) Ambil 100ul supernatan (lapisan atas), tambahkan 900ul sampel yang larut kembali, kocok hingga merata;
4) Ambil 50μl untuk menguji
Faktor pengenceran: 50
Catatan: Jika konsentrasi residu obat dari sampel berada di luar kisaran kurva, sampel dapat diencerkan lebih lanjut untuk pengujian (misalnya: ambil 50ul supernatan (lapisan atas) ke dalam tabung sentrifus baru, tambahkan 950 air deionisasi, faktor pengenceran adalah 100).

5.3Persiapan sampel Kacang Tanah
1) Ambil 1,0±0,05g sampel kacang tanah yang digiling ke dalam tabung centrifuge 50ml;tambahkan 5ml larutan ekstrak sampel, lalu tambahkan 4ml n-heksana;
2) Kocok sepenuhnya selama 3 menit (atau kocok dengan tangan selama di atas 5 menit), sentrifus di atas 4000r/menit pada 20℃ selama 10 menit;
3) Buang cairan bening lapisan atas, ambil cairan lapisan tengah 100ul, tambahkan sampel 900ul yang larut kembali, kocok hingga merata;
4) Ambil 50μl untuk menguji
Faktor pengenceran: 50
Catatan: Jika konsentrasi residu obat dari sampel berada di luar kisaran kurva, sampel dapat diencerkan lebih lanjut untuk pengujian (misalnya: ambil cairan lapisan tengah 50ul ke dalam tabung sentrifus baru, tambahkan 950 air deionisasi, faktor pengenceran adalah 100 ).

 

6. Prosedur ELISA

6.1 Instruksi
1. Bawa reagen ELISA ke suhu kamar (20 - 25 °C) sebelum digunakan.
2. Masukkan reagen ELISA kembali ke 2-8 segera setelah digunakan
3. Reproduksibilitas ELISA dalam proses analisis sangat tergantung pada konsistensi pelat cuci, pengoperasian pelat cuci yang benar adalah titik penentuan Program ELISA
4. Dalam semua proses inkubasi suhu konstan, hindari paparan cahaya, tutup pelat mikro dengan membran penutup.

6.2 Prosedur operasi

1. Letakkan kit pada suhu kamar (20-25°C) setidaknya selama 30 menit, perhatikan bahwa setiap reagen harus dikocok dengan baik sebelum digunakan;
2. Tempatkan strip microwell yang diinginkan di bingkai pelat.Pelat mikro yang tidak digunakan harus disegel kembali dan disimpan pada suhu 2-8°C, tidak dibekukan.
3. Persiapan larutan: Ambil 40ml dari 20x buffer pencuci pekat dan larutkan dalam air deionisasi dengan perbandingan 1:19 (1 bagian dari 20x buffer pencuci pekat + 19 bagian air deionisasi), atau siapkan sesuai kebutuhan.
4. Penomoran: Beri nomor sumur mikro sesuai dengan sampel dan larutan standar;setiap sampel dan larutan standar harus dilakukan dalam rangkap dua;merekam posisi mereka.
5. Tambahkan standar/sampel: Tambahkan 50 L sampel atau larutan standar ke sumur ganda yang terpisah, lalu tambahkan enzim konjugat, 50 L/sumur;kemudian larutan kerja antibodi, 50 L/sumur.Aduk perlahan dengan mengocok pelat dengan tangan, tutup pelat mikro dengan film penutup, dan inkubasi pada suhu 25 °C selama 30 menit dalam gelap.
6. Cuci pelat mikro: Buka film penutup dengan hati-hati dan tuangkan cairan ke dalam sumur mikro;tambahkan 250 L/sumur buffer pencuci, cuci bersih 4-5 kali selama 15-30 detik setiap kali, kemudian keluarkan dengan kertas penyerap Keringkan.(Tusuk gelembung udara dengan tombak yang tidak digunakan setelah pengeringan)
7. Perkembangan warna: Tambahkan 50 L larutan Substrat A ke setiap sumur, diikuti dengan 50 L Larutan B. Campur perlahan dengan mengocok pelat dengan tangan dan inkubasi selama 15 menit pada suhu 25 °C dalam gelap untuk pewarnaan.
8. Uji: Tambahkan 50 L Stop Solution ke setiap sumur.Aduk perlahan dengan mengocok piring dengan tangan.Atur panjang gelombang pembaca lempeng mikro menjadi 450 nm untuk menentukan nilai OD masing-masing sumur.(Disarankan untuk membaca nilai OD pada panjang gelombang ganda 450/630 nm dalam waktu 5 menit).

 

7. Hasil penilaian

Ada dua metode untuk menilai hasil;yang pertama adalah penilaian kasar, sedangkan yang kedua adalah penentuan kuantitatif.Perhatikan bahwa nilai OD sampel memiliki korelasi negatif dengan Zearalenone dalam sampel
7.1 Penentuan kualitatif
Rentang konsentrasi (ppb) dapat diperoleh dengan membandingkan nilai absorbansi rata-rata dengan standar.Misalkan nilai absorbansi Sampel Satu adalah 0,3, Sampel Dua adalah 1,0, dan standarnya adalah: 0ppb sebesar 2,243;0,1ppb dari 1,816;0.3ppb dari 1.415;0,9ppb dari 0,74;2,7ppb dari 0,313;8.1ppb dari 0.155.Kemudian konsentrasi sampel satu berada pada kisaran 2.7ppb ~ 8.1ppb;Contoh Dua adalah 0.3ppb ~ 0.9ppb.Rentang konsentrasi Zearalenone dalam sampel dapat diperoleh dengan dikalikan dengan pengenceran sampel yang sesuai.
7. 2 Analisis Kuantitatif
Untuk menghitung konsentrasi sampel, kurva standar harus dibuat.Sebelum kurva standar dibuat, konsep % absorbansi harus diketahui.
Perhitungan % absorbansi:

 

Persentase nilai absorbansi =	B	×100%
	B0

B—nilai OD rata-rata dari sampel atau larutan standar
B0—nilai OD rata-rata dari larutan standar 0 ng/mL
Standar nol dengan demikian dibuat sama dengan 100% dan nilai absorbansi dikutip dalam persentase.Nilai yang dihitung untuk standar dimasukkan dalam sistem koordinat pada kertas grafik semilogaritmik terhadap konsentrasi Zearalenon [ng/mL].Konsentrasi Zearalenone dalam ng/ml yang sesuai dengan absorbansi setiap sampel dapat dibaca dari kurva kalibrasi.
Perangkat lunak khusus untuk analisis hasil ELISA akan memfasilitasi penentuan ganda atau ganda.Jika Anda membutuhkan, silakan hubungi untuk meminta.

8. Tindakan Pencegahan

1. Suhu kamar di bawah 25 atau suhu reagen dan sampel yang tidak dikembalikan ke suhu kamar (20-25 ) akan menyebabkan nilai OD standar yang lebih rendah.
2. Kekeringan pelat mikro dalam proses pencucian akan disertai dengan situasi termasuk kurva standar non-linier dan reproduktifitas yang tidak diinginkan;Jadi lanjutkan ke langkah berikutnya segera setelah mencuci.
3. Aduk rata sebelum menambahkan reagen apapun.
4. Solusi stop adalah larutan asam sulfat 2 M, hindari kontak dengan kulit.
5. Jangan gunakan kit melebihi tanggal kedaluwarsa.Penggunaan reagen yang diencerkan atau dipalsukan dari kit akan menyebabkan perubahan sensitivitas dan nilai OD pendeteksian.Jangan menukar reagen dari kit dengan nomor lot yang berbeda untuk digunakan.
6. Penyimpanan: simpan pada suhu 2-8 , tidak beku.Masukkan pelat mikro yang tidak digunakan ke dalam kantong penyegel otomatis untuk menyegelnya kembali.Zat standar dan pembentuk warna tidak berwarna peka terhadap cahaya, sehingga tidak dapat langsung terkena cahaya.
7. Buang larutan pewarna dengan warna apapun yang menunjukkan degenerasi larutan ini.Nilai pendeteksian (450/630nm) dari larutan standar 0 (0 ppb) kurang dari 0,5((A450nm<0,5)) menunjukkan degenerasinya.
8. Suhu reaksi optimum adalah 25 , dan suhu yang terlalu tinggi atau terlalu rendah akan mengakibatkan perubahan sensitivitas pendeteksian dan nilai OD.

9. Penyimpanan dan tanggal kedaluwarsa

Penyimpanan: simpan pada 2-8 , tidak beku.
Tanggal kedaluwarsa: 12 bulan;tanggal produksi ada di box.
Catatan: Jika paket Vakum microplate memiliki kebocoran, itu masih berlaku untuk digunakan, tidak mempengaruhi hasil tes, santai untuk digunakan.

 

 

 

 

 

 

 

Q1: Kapan akan dikirim?
A1: Kami akan mengirimkan barang untuk Anda sesegera mungkin dalam waktu 7 hari kerja setelah menerima pembayaran.(Dalam kasus faktor eksternal seperti epidemi, pengiriman mungkin tertunda)

 

Q2: Apakah mendukung OEM/ODM?
A2: Ini dapat didukung, tetapi jumlah spesifik harus lebih dari 100.000 buah, yang nyaman untuk produk yang disesuaikan.

 

Q3: Bagaimana kinerja pabrik Anda dalam hal kontrol kualitas?
A3: Kami memiliki sertifikasi ISO9001 dan ISO13485 secara nasional.Proses produksi kami sesuai dengan prosedur standar untuk memastikan kualitas produk yang optimal.

 

Q4: Bagaimana memberikan layanan purna jual?
A4: Kami menyediakan layanan purna jual teknis online profesional.Kami dapat memberi Anda panduan pribadi melalui video, telepon, dll.

 

Q5: Apa metode pembayarannya?
A5: Kami menerima pembayaran dengan T/T.

 

Q6: Bagaimana cara mengirim?
A6: Pilih metode pengiriman terbaik untuk Anda dengan mendapatkan penawaran dari banyak operator kooperatif kami, dan juga mengirimkan sesuai dengan kebutuhan Anda.