30 menit Aflatoksin Peanut Elisa Mycotoxin Testing Kits Untuk Jaringan Jagung 96 Wells / Kit

Total Aflatoksin ELISA Test Kit untuk Tissue Kacang Jagung Pakan 96 Sumur/Kit

 

1.Kit Pengujian MikotoksinPrinsip

Kit ini didasarkan pada immunoassay enzim kompetitif tidak langsung untuk mendeteksi aflatoksin total.Antigen terkonjugasi pra-dilapisi pada strip microwell.Aflatoksin dalam sampel bersaing dengan antigen terkonjugasi yang telah dilapisi sebelumnya pada strip microwell untuk antibodi anti-aflatoksin.Setelah enzim konjugat ditambahkan, substrat TMB ditambahkan untuk pewarnaan.Nilai optical density (OD) sampel berkorelasi negatif dengan aflatoksin dalam sampel.Nilai ini dibandingkan dengan kurva standar, dan tingkat residu aflatoksin kemudian diperoleh.

 

2. Spesifikasi Teknis

Sensitivitas: 0,02 ppb
Suhu inkubator: 25
Waktu budaya: 30 menit 15 menit
Batas deteksi:
Pakan, beras, jagung, kacang tanah, tisu, minyak goreng 2ppb
Tingkat Reaksi Silang:
Aflatoksin B1 100%
Aflatoksin M1 91,2%
Aflatoksin B2 68,4%
Aflatoksin G1 4.7%
Aflatoksin G2 2.7%
Tingkat pemulihan:
Pakan, beras, jagung, kacang tanah, tisu, minyak goreng 95±35%

 

3. Komponen Kit Pengujian Mikotoksin

 

1	Strip sumur mikro	12 strip dengan masing-masing 8 sumur yang dapat dilepas
2	6× larutan standar (masing-masing 1 mL)	0ppb	0,02ppb
		0,06ppb	0.18ppb
		0.54ppb	1.62ppb
3	Konjugasi enzim	7ml	topi merah
4	Solusi kerja antibodi	7ml	topi biru
5	Substrat A	7ml	topi putih
6	Substrat B	7ml	topi hitam
7	Hentikan solusi	7ml	topi kuning
8	20 × buffer pencuci terkonsentrasi	40ml	topi putih
9	20× larutan pelarutan kembali pekat	50ml	topi transparan

 

4. Persiapan Sampel

Petunjuk penggunaan (hal-hal berikut harus ditangani sebelum pra-pemrosesan)
1) Eksperimen hanya dapat menggunakan tip sekali pakai, dan tip harus diganti saat mengaspirasi reagen yang berbeda;
2) Sebelum percobaan, setiap peralatan percobaan harus dibersihkan dan dibersihkan kembali jika perlu untuk menghindari kontaminasi yang mengganggu hasil percobaan.

Persiapan larutan sebelum perlakuan awal sampel:
1) Contoh larutan disolusi
Gunakan 1 bagian 20X larutan pelarutan kembali pekat dan larutkan dengan 19 bagian air deionisasi untuk mendapatkan larutan pelarutan kembali sampel yang siap digunakan.
2) Ekstrak sampel
Gunakan 7 bagian metanol dan larutkan dalam 3 bagian air deionisasi untuk ekstrak sampel siap pakai.

Persiapan Sampel
4.1 Persiapan sampel jaringan, pakan, beras dan jagung
1) Masukkan 1,0±0,05g sampel tanah ke dalam tabung sentrifus 50ml, tambahkan 5ml ekstrak sampel, kocok selama 3 menit, sentrifus pada 20 °C selama 10 menit di atas 4000r/menit;
2) Ambil 100ul supernatan, tambahkan 700ul larutan pelarutan kembali sampel, kocok rata;
3) Ambil 50μl untuk pengujian
Faktor pengenceran: 40

4.2 Persiapan sampel minyak nabati
1) Ambil sampel minyak nabati 1,0±0,05g ke dalam tabung centrifuge 50ml;tambahkan 5ml ekstrak sampel, lalu tambahkan 4ml n-heksana, kocok selama 3 menit, sentrifus pada 4000r/menit pada 20℃ selama 10 menit;
2) Buang supernatan, ambil 100ul larutan lapisan tengah, tambahkan 700ul larutan pelarut kembali sampel, dan kocok rata;
3) Ambil 50μl untuk pengujian
Faktor pengenceran: 40

4.3 Persiapan sampel kacang
1) Masukkan 1,0±0,05g sampel kacang tanah yang dihancurkan ke dalam tabung centrifuge 50ml;tambahkan 5ml ekstrak sampel, lalu tambahkan 4ml n-heksana, kocok selama 3 menit, sentrifus pada 4000r/menit di atas 20℃ selama 10 menit;
2) Buang supernatan, ambil 100ul larutan lapisan tengah, tambahkan 400ul larutan pelarut kembali sampel, dan kocok rata;
3) Ambil 50μl untuk pengujian
Faktor pengenceran: 25

 

5. Prosedur ELISA

5.1 Petunjuk penggunaan
1) Bawa reagen ELISA ke suhu kamar (20 - 25 °C) sebelum digunakan.
2) Masukkan reagen ELISA kembali ke suhu 2-8°C segera setelah digunakan.
3) Reproduksibilitas proses analisis ELISA sangat bergantung pada konsistensi pencucian piring, dan operasi pencucian piring yang benar adalah fokus penentuan prosedur ELISA.
4) Selama semua proses inkubasi suhu konstan, hindari cahaya, dan tutup pelat mikro dengan film penutup.

5.2 Prosedur operasi
1)Bawa test kit ke suhu kamar (20-25 ) setidaknya selama 30 menit, perhatikan bahwa setiap reagen harus dikocok secara merata sebelum digunakan;
2)Masukkan strip sumur mikro yang diperlukan ke dalam bingkai pelat.Segel kembali microplate yang tidak digunakan, disimpan pada 2-8 , tidak beku.
3)Persiapan larutan: ambil 40ml 20x buffer pencuci pekat, larutkan dengan air deionisasi pada 1:19 (1 bagian 20x buffer pencuci pekat + 19 bagian air deionisasi), atau siapkan sesuai jumlah yang dibutuhkan.
4)Penomoran: beri nomor sumur mikro menurut sampel dan larutan standar;setiap sampel dan larutan standar harus dilakukan dalam rangkap dua;merekam posisi mereka.
5)Tambahkan standar/sampel: Tambahkan 50 L sampel atau larutan standar ke dalam sumur duplikat yang terpisah, kemudian tambahkan enzim konjugat, 50 L/sumur;kemudian larutan kerja antibodi, 50 L/sumur.Aduk perlahan dengan mengocok pelat secara manual, tutup pelat mikro dengan membran penutup, inkubasi pada suhu 25 ° C selama 30 menit dalam gelap.
6)Cuci microplate: Buka membran penutup dengan hati-hati, tuangkan cairan dari microwell;tambahkan 250 L/sumur buffer cuci, cuci bersih 4-5 kali, 15-30 detik setiap kali, lalu keluarkan dan tutup dengan kertas penyerap. (Gunakan tombak yang tidak digunakan untuk menembus gelembung setelah kering)
7)Pewarnaan: tambahkan 50 L larutan substrat A kemudian 50 L larutan B ke dalam masing-masing sumur.Campur perlahan dengan mengocok pelat secara manual, dan inkubasi pada suhu 25 ° C selama 15 menit dalam gelap untuk pewarnaan.
8)Penentuan: tambahkan 50 L stop solution ke dalam setiap sumur.Aduk perlahan dengan mengocok piring secara manual.Atur panjang gelombang pembaca lempeng mikro pada 450 nm untuk menentukan nilai OD setiap sumur.(Merekomendasikan untuk membaca nilai OD pada panjang gelombang ganda 450/630 nm dalam waktu 5 menit).

 

6. Hasil penilaian

Ada dua metode untuk menilai hasil;yang pertama adalah penilaian kasar, sedangkan yang kedua adalah penentuan kuantitatif.Perhatikan bahwa nilai OD sampel memiliki korelasi negatif dengan Total Aflatoksin dalam sampel.

6.1 Penentuan kualitatif
Rentang konsentrasi (ppb) dapat diperoleh dengan membandingkan nilai absorbansi rata-rata dengan standar.Misalkan nilai absorbansi Sampel Satu adalah 0,3, Sampel Dua adalah 1,0, dan standarnya adalah: 0ppb sebesar 2,243;0,02ppb dari 1,816;0,06ppb dari 1,415;0,18ppb dari 0,74;0,54ppb dari 0,313;1.62ppb dari 0.155.Kemudian konsentrasi sampel satu berada pada kisaran 0.54ppb ~ 1.62ppb;Contoh Dua adalah 0,06ppb ~ 0,18ppb.Rentang konsentrasi aflatoksin total dalam sampel dapat diperoleh dengan dikalikan dengan pengenceran sampel yang sesuai.

6. 2 Analisis Kuantitatif
Untuk menghitung konsentrasi sampel, kurva standar harus dibuat.Sebelum kurva standar dibuat, konsep % absorbansi harus diketahui.
Perhitungan % absorbansi:

 

Persentase nilai absorbansi =	B	×100%
	B0

 

B—nilai OD rata-rata dari sampel atau larutan standar.
B0—nilai OD rata-rata dari larutan standar 0 ng/mL.
Standar nol dengan demikian dibuat sama dengan 100% dan nilai absorbansi dikutip dalam persentase.Nilai yang dihitung untuk standar dimasukkan dalam sistem koordinat pada kertas grafik semilogaritmik terhadap konsentrasi aflatoksin total [ng/L].Konsentrasi aflatoksin total dalam ng/L (ppb) yang sesuai dengan absorbansi masing-masing sampel dapat dibaca dari kurva kalibrasi.
Perangkat lunak khusus untuk analisis hasil ELISA akan memfasilitasi penentuan ganda atau ganda.Jika Anda membutuhkan, silakan hubungi untuk meminta.

7. Tindakan pencegahan

1)Suhu kamar di bawah 25 atau suhu reagen dan sampel yang tidak dikembalikan ke suhu kamar (20-25 ) akan menyebabkan nilai OD standar yang lebih rendah.
2)Kekeringan pelat mikro dalam proses pencucian akan disertai dengan situasi termasuk kurva standar non-linier dan reproduktifitas yang tidak diinginkan;Jadi lanjutkan ke langkah berikutnya segera setelah mencuci.
3)Aduk rata sebelum menambahkan reagen apa pun.
4)Solusi stop adalah larutan asam sulfat 2 M, hindari kontak dengan kulit.
5)Jangan gunakan kit melebihi tanggal kedaluwarsa.Penggunaan reagen yang diencerkan atau dipalsukan dari kit akan menyebabkan perubahan sensitivitas dan nilai OD pendeteksian.Jangan menukar reagen dari kit dengan nomor lot yang berbeda untuk digunakan.
6)Penyimpanan: simpan pada 2-8 , tidak beku.Masukkan pelat mikro yang tidak digunakan ke dalam kantong penyegel otomatis untuk menyegelnya kembali.Zat standar dan pembentuk warna tidak berwarna peka terhadap cahaya, sehingga tidak dapat langsung terkena cahaya.
7)Buang larutan pewarna dengan warna apapun yang menunjukkan degenerasi larutan ini.Nilai pendeteksian (450/630nm) dari larutan standar 0 (0 ppb) kurang dari 0,5((A450nm<0,5)) menunjukkan degenerasinya.
8)Suhu reaksi optimum adalah 25 , dan suhu yang terlalu tinggi atau terlalu rendah akan mengakibatkan perubahan sensitivitas pendeteksian dan nilai OD.

8. Penyimpanan dan tanggal kedaluwarsa

Penyimpanan: simpan pada 2-8 , tidak beku.
Tanggal kedaluwarsa: 12 bulan;tanggal produksi ada di box.
Catatan: Jika paket Vakum microplate memiliki kebocoran, itu masih berlaku untuk digunakan, tidak mempengaruhi hasil tes, santai untuk digunakan.

 

 

 

 

 

 

Q1: Kapan akan dikirim?
A1: Kami akan mengirimkan barang untuk Anda sesegera mungkin dalam waktu 7 hari kerja setelah menerima pembayaran.(Dalam kasus faktor eksternal seperti epidemi, pengiriman mungkin tertunda)

 

Q2: Apakah mendukung OEM/ODM?
A2: Ini dapat didukung, tetapi jumlah spesifik harus lebih dari 100.000 buah, yang nyaman untuk produk yang disesuaikan.

 

Q3: Bagaimana kinerja pabrik Anda dalam hal kontrol kualitas?
A3: Kami memiliki sertifikasi ISO9001 dan ISO13485 secara nasional.Proses produksi kami sesuai dengan prosedur standar untuk memastikan kualitas produk yang optimal.

 

Q4: Bagaimana memberikan layanan purna jual?
A4: Kami menyediakan layanan purna jual teknis online profesional.Kami dapat memberi Anda panduan pribadi melalui video, telepon, dll.

 

Q5: Apa metode pembayarannya?
A5: Kami menerima pembayaran dengan T/T.

 

Q6: Bagaimana cara mengirim?
A6: Pilih metode pengiriman terbaik untuk Anda dengan mendapatkan penawaran dari banyak operator kooperatif kami, dan juga mengirimkan sesuai dengan kebutuhan Anda.