Trichothecenes T-2 Peanut Test Kit Peralatan Pengujian Aflatoksin ELISA Untuk Pakan Beras 3ppb

Kit uji ELISA Trichothecenes (T-2) untuk Pakan Kacang Tanah 96 Sumur/Kit

 

1. Prinsip

Test kit ini didasarkan pada enzim immunoassay kompetitif untuk mendeteksi Trichothecenes (T-2).Antigen kopling sudah dilapisi sebelumnya pada garis-garis sumur mikro.Trichothecenes (T-2) dalam sampel dan antigen coupling yang telah dilapisi sebelumnya pada strip microwell bersaing untuk mendapatkan antibodi anti-Trichothecenes (T-2).Setelah penambahan enzim konjugat, substrat TMB ditambahkan untuk pewarnaan.Nilai optical density (OD) sampel berkorelasi negatif dengan Trichothecenes (T-2) pada sampel.Nilai ini dibandingkan dengan kurva standar dan selanjutnya diperoleh residu Trichothecenes (T-2).

 

2. Spesifikasi teknis

Sensitivitas: 0,05 ppb
Suhu inkubator: 25
Waktu inkubator: 30 menit 15 menit
Batas deteksi:
Pakan, kacang, nasi 3ppb
Laju reaksi silang:
Trichothecenes (T-2) 100%
Tingkat pemulihan:
Pakan, beras 90±25%
Kacang 85±25%

 

3. Komponen

 

1	Strip sumur mikro	12 strip dengan masing-masing 8 sumur yang dapat dilepas
2	6× larutan standar (masing-masing 1 mL)	0ppb	0,05ppb
		0.15ppb	0.45ppb
		1.35ppb	4.05ppb
3	Konjugasi enzim	7ml	topi merah
4	Solusi kerja antibodi	7ml	topi biru
5	Substrat A	7ml	topi putih
6	SubstratB	7ml	topi hitam
7	Hentikan solusi	7ml	topi kuning
8	20 × buffer pencuci terkonsentrasi	15ml	topi putih
9	5× larutan pelarutan kembali pekat	50ml * 2	topi transparan

 

4. Bahan yang dibutuhkan tetapi tidak disediakan

1) Peralatan: ELISA Reader (450 nm/630nm), homogenizer, shaker, centrifuge, timbangan: sensitif kuantitas 0,01g, perangkat pengering nitrogen, inkubator, pipet bertingkat, printer
2) Mikropipet: saluran tunggal 20ml ~ 200ml, 100ml ~ 1000ml, multi-saluran 30～300 l
3) Reagen: Metanol.

5. Sampel pra-perawatan

Instruksi (Hal-hal berikut harus ditangani sebelum pra-perawatan)
1) Hanya ujung sekali pakai yang dapat digunakan untuk eksperimen dan ujungnya harus diganti bila digunakan untuk menyerap reagen yang berbeda;
2) Sebelum percobaan, setiap alat percobaan harus bersih dan bila perlu dibersihkan kembali untuk menghindari kontaminasi yang mengganggu hasil percobaan.

Persiapan larutan sebelum sampel pra-perawatan:
1) Contoh solusi pelarutan kembali
Gunakan 1 bagian (5X) larutan pelarut kembali pekat dan larutkan dengan 4 bagian air deionisasi untuk mendapatkan larutan pelarut kembali sampel yang siap pakai.
2) Contoh larutan ekstrak
Gunakan 1 bagian Metanol dan larutkan dengan 1 bagian larutan pelarut kembali sampel untuk mendapatkan larutan ekstrak sampel yang siap pakai.
Persiapan Pakan, kacang tanah, sampel beras

1) Ambil 1,0±0,05g sampel yang digiling ke dalam tabung sentrifus 50ml, tambahkan larutan ekstrak sampel 5ml, kocok selama 3 menit, sentrifus di atas 4000r/menit pada 20℃ selama 10 menit;
2) Ambil supernatan 100ul (lapisan atas), tambahkan larutan pelarutan kembali sampel 400ul, kocok hingga merata;
3) Ambil 50μl untuk diuji
Faktor pengenceran: 25

 

6. Prosedur ELISA

6.1 Instruksi

1)Bawa reagen ELISA ke suhu kamar (20 - 25 °C) sebelum digunakan.
2)Masukkan reagen ELISA kembali ke 2-8 segera setelah digunakan
3)Reproduksibilitas ELISA dalam proses analisis sangat tergantung pada konsistensi pelat cuci, pengoperasian pelat cuci yang benar adalah titik penentuan Program ELISA
4)Dalam semua proses inkubasi suhu konstan, hindari paparan cahaya, tutup pelat mikro dengan membran penutup.

6. 2 Prosedur operasi

1)Bawa test kit ke suhu kamar (20-25 ) setidaknya selama 30 menit, perhatikan bahwa setiap reagen harus dikocok secara merata sebelum digunakan;
2)Masukkan strip sumur mikro yang diperlukan ke dalam bingkai pelat.Segel kembali microplate yang tidak digunakan, disimpan pada 2-8 , tidak beku.
3)Persiapan larutan: ambil 15ml 20x buffer pencuci pekat, larutkan dengan air deionisasi pada 1:19 (1 bagian 20x buffer pencuci pekat + 19 bagian air deionisasi), atau siapkan sesuai jumlah yang dibutuhkan.
4)Penomoran: beri nomor sumur mikro menurut sampel dan larutan standar;setiap sampel dan larutan standar harus dilakukan dalam rangkap dua;merekam posisi mereka.
5)Tambahkan standar/sampel: Tambahkan 50 L sampel atau larutan standar ke dalam sumur duplikat yang terpisah, kemudian tambahkan enzim konjugat, 50 L/sumur;kemudian larutan kerja antibodi, 50 L/sumur.Aduk perlahan dengan mengocok plat secara manual, tutup mikroplate dengan membran penutup, inkubasi pada suhu 25 °C selama 30 menit dalam gelap.
6)Cuci microplate: Buka membran penutup dengan hati-hati, tuangkan cairan dari microwell;tambahkan 250 L/sumur buffer cuci, cuci bersih 4-5 kali, 15-30 detik setiap kali, lalu keluarkan dan tutup dengan kertas penyerap. (Gunakan tombak yang tidak digunakan untuk menembus gelembung setelah kering)
7)Pewarnaan: tambahkan 50 L larutan substrat A kemudian 50 L larutan B ke dalam masing-masing sumur.Campur perlahan dengan mengocok pelat secara manual, dan inkubasi pada suhu 25 °C selama 15 menit dalam gelap untuk pewarnaan.
8)Penentuan: tambahkan 50 L stop solution ke dalam setiap sumur.Aduk perlahan dengan mengocok piring secara manual.Atur panjang gelombang pembaca lempeng mikro pada 450 nm untuk menentukan nilai OD setiap sumur.(Merekomendasikan untuk membaca nilai OD pada panjang gelombang ganda 450/630 nm dalam waktu 5 menit).

 

7. Hasil penilaian

Ada dua metode untuk menilai hasil;yang pertama adalah penilaian kasar, sedangkan yang kedua adalah penentuan kuantitatif.Perhatikan bahwa nilai OD sampel memiliki korelasi negatif dengan Trichothecenes (T-2) dalam sampel
7.1 Penentuan kualitatif
Rentang konsentrasi (ppb) dapat diperoleh dengan membandingkan nilai absorbansi rata-rata dengan standar.Misalkan nilai absorbansi Sampel Satu adalah 0,3, Sampel Dua adalah 1,0, dan standarnya adalah: 0ppb sebesar 2,243;0,05ppb dari 1,816;0,15ppb dari 1,415;0,45ppb dari 0,74;1,35ppb dari 0,313;4.05ppb dari 0.155.Kemudian konsentrasi sampel satu berada pada kisaran 1,35ppb ~ 4,05ppb;Contoh Dua adalah 0.15ppb ~ 0.45ppb.Kisaran konsentrasi Trichothecenes (T-2) dalam sampel dapat diperoleh dengan dikalikan dengan pengenceran sampel yang sesuai.
7. 2 Analisis Kuantitatif
Untuk menghitung konsentrasi sampel, kurva standar harus dibuat.Sebelum kurva standar dibuat, konsep % absorbansi harus diketahui.
Perhitungan % absorbansi:

 

Persentase nilai absorbansi =	B	×100%
	B0

 

B—nilai OD rata-rata dari sampel atau larutan standar
B0—nilai OD rata-rata dari larutan standar 0 ng/mL
Standar nol dengan demikian dibuat sama dengan 100% dan nilai absorbansi dikutip dalam persentase.Nilai yang dihitung untuk standar dimasukkan dalam sistem koordinat pada kertas grafik semilogaritmik terhadap konsentrasi Trichothecenes (T-2) [ng/mL].Konsentrasi Trichothecenes (T-2) dalam ng/mL yang sesuai dengan absorbansi masing-masing sampel dapat dibaca dari kurva kalibrasi.
Perangkat lunak khusus untuk analisis hasil ELISA akan memfasilitasi penentuan ganda atau ganda.Jika Anda membutuhkan, silakan hubungi untuk meminta.

 

8. Tindakan Pencegahan
1)Suhu kamar di bawah 25 atau suhu reagen dan sampel yang tidak dikembalikan ke suhu kamar (20-25 ) akan menyebabkan nilai OD standar yang lebih rendah.
2)Kekeringan pelat mikro dalam proses pencucian akan disertai dengan situasi termasuk kurva standar non-linier dan reproduktifitas yang tidak diinginkan;Jadi lanjutkan ke langkah berikutnya segera setelah mencuci.
3)Aduk rata sebelum menambahkan reagen apa pun.
4)Solusi stop adalah larutan asam sulfat 2 M, hindari kontak dengan kulit.
5)Jangan gunakan kit melebihi tanggal kedaluwarsa.Penggunaan reagen yang diencerkan atau dipalsukan dari kit akan menyebabkan perubahan sensitivitas dan nilai OD pendeteksian.Jangan menukar reagen dari kit dengan nomor lot yang berbeda untuk digunakan.
6)Penyimpanan: simpan pada 2-8 , tidak beku.Masukkan pelat mikro yang tidak digunakan ke dalam kantong penyegel otomatis untuk menyegelnya kembali.Zat standar dan pembentuk warna tidak berwarna peka terhadap cahaya, sehingga tidak dapat langsung terkena cahaya.
7)Buang larutan pewarna dengan warna apapun yang menunjukkan degenerasi larutan ini.Nilai pendeteksian (450/630nm) dari larutan standar 0 (0 ppb) kurang dari 0,5((A450nm<0,5)) menunjukkan degenerasinya.
8) Suhu reaksi optimum adalah 25℃, dan suhu yang terlalu tinggi atau terlalu rendah akan mengakibatkan perubahan sensitivitas pendeteksian dan nilai OD.

 

9. Penyimpanan dan tanggal kedaluwarsa
Penyimpanan: simpan pada 2-8 , tidak beku.
Tanggal kedaluwarsa: 12 bulan;tanggal produksi ada di box.
Catatan: Jika paket Vakum microplate memiliki kebocoran, itu masih berlaku untuk digunakan, tidak mempengaruhi hasil tes, santai untuk digunakan.

 

 

 

 

 

 

 

 

Q1: Berapa lama waktu yang Anda butuhkan untuk mengirim?
A1: Biasanya dikirim dalam 7 hari kerja.

 

Q2: Apakah Anda mendukung OEM/ODM?
A2: dapat didukung.Kami dapat menyesuaikan sesuai dengan kebutuhan spesifik Anda dan jumlah tertentu.

 

Q3: Bagaimana kinerja pabrik Anda dalam hal kontrol kualitas?
A3: Kami memiliki sertifikasi ISO9001 dan sertifikasi ISO13485, sejauh ini semua proses produksi, kami memiliki aturan standar, kami mematuhi perilaku dan undang-undang pemerintah yang relevan.

 

Q4: Apakah layanan purna jual dijamin?
A4: Kami menyediakan layanan purna jual teknis online profesional.Jika produk gagal selama percobaan, kami dapat menyediakan
bimbingan satu-ke-satu melalui telepon, video dan bentuk lainnya.

 

Q5: Berapa jumlah pesanan minimum Anda?
A5: 1 Kit.

 

Q6: Apa metode pengirimannya?
A6: Dapat dikirim dengan express (FEDEX, UPS, DHL, EMS, dll) atau melalui udara dan darat. Mohon konfirmasi kami sebelum melakukan pemesanan.